培養(yǎng)某一類(lèi)型細(xì)胞沒(méi)有固定的培養(yǎng)條件。在MEM中培養(yǎng)的細(xì)胞，很可能在DMEM或M199中同樣很容易生長(zhǎng)?？傊?，使用MEM做粘附細(xì)胞培養(yǎng)、RPMI-1640做懸浮細(xì)胞培養(yǎng)是一個(gè)好的開(kāi)始。

        1、Minimum Essential Medium（MEM）：也稱MAX低必需培養(yǎng)基，它僅含有 12 種必需氨基酸、谷氨酰胺和 8 種維生素。成分簡(jiǎn)單，可廣泛適應(yīng)各種已建成細(xì)胞系和不同地方的哺乳動(dòng)物細(xì)胞類(lèi)型的培養(yǎng)。MEM-Alpha 一般用于培養(yǎng)一些難培養(yǎng)細(xì)胞類(lèi)型，而其它沒(méi)有特殊之處的細(xì)胞株則幾乎均可采用 MEM 來(lái)培養(yǎng)。

        2、BEM(DMEM)培養(yǎng)基：是為小鼠成纖維細(xì)胞設(shè)計(jì)的，現(xiàn)在常用于貼壁細(xì)胞的培養(yǎng)。DMEM的氨基酸濃度是MEM的兩倍，維生素濃度是MEM的4倍，采用雙倍的HCO3-和CO2濃度起到更好的緩沖作用。MAX初的配方中葡萄糖含量為1000 mg/L，后來(lái)為了某些細(xì)胞的生長(zhǎng)需要，將葡萄糖含量又調(diào)整為4500 mg/L，這就是大家常說(shuō)的低糖和高糖了。

        DMEM-高糖（標(biāo)準(zhǔn)型）是一種應(yīng)用十分廣泛的培養(yǎng)基，可用于許多哺乳動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng), 更適合高密度懸浮細(xì)胞培養(yǎng)。適用于附著性較差，但又不希望它脫離原來(lái)生長(zhǎng)點(diǎn)的克隆培養(yǎng)，也可用于雜交瘤中骨髓瘤細(xì)胞和 DNA 轉(zhuǎn)染的轉(zhuǎn)化細(xì)胞的培養(yǎng)。

        DMEM-低糖（標(biāo)準(zhǔn)型）是一種應(yīng)用十分廣泛的培養(yǎng)基，可用于許多哺乳動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)。低糖適于依賴性貼壁細(xì)胞培養(yǎng)，特別適用于生長(zhǎng)速度快、附著性較差的腫瘤細(xì)胞培養(yǎng)。

        3、aMEM培養(yǎng)基：含有附加的氨基酸、維生素以及核苷和脂肪酸，它可廣泛應(yīng)用于各種細(xì)胞類(lèi)型，包括對(duì)營(yíng)養(yǎng)成分要求苛刻的細(xì)胞。

        4、Ham’s F12培養(yǎng)基：是為在低血清濃度下克隆CHO細(xì)胞而設(shè)計(jì)的，現(xiàn)在也廣泛應(yīng)用于克隆形成率的分析及原代培養(yǎng)。F12還可以與DMEM等體積混合使用，得到一種高濃度與成分多樣化相結(jié)合的產(chǎn)物，這種培養(yǎng)基已應(yīng)用于許多原代培養(yǎng)及更難養(yǎng)的細(xì)胞系的培養(yǎng)。

        5、DMEM/F12：DMEM/F12 培養(yǎng)基適于克隆密度的培養(yǎng)。F12 培養(yǎng)基成分復(fù)雜，含有多種微量元素，和 DMEM 以 1：1 結(jié)合，稱為 DMEM/F12 培養(yǎng)基。（DMEM/F12medium），作為開(kāi)發(fā)無(wú)血清配方的基礎(chǔ)，以利用 F12 含有較豐富的成分和 DMEM 含有較高濃度的營(yíng)養(yǎng)成分為優(yōu)點(diǎn)。該培養(yǎng)基適用于血清含量較低條件下哺乳動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)。為了增強(qiáng)該培養(yǎng)基的緩沖能力，改良之一是在 DMEM/F12（1：1）中加入 15 mMHEPES 緩沖液。

        6、RPMI-1640 Medium：RPMI-1640 廣泛應(yīng)用于哺乳動(dòng)物、特殊造血細(xì)胞、正常或惡性增生的白細(xì)胞，雜交瘤細(xì)胞的培養(yǎng)，是目前應(yīng)用十分廣泛的培養(yǎng)基。主要用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng)。其它像 K-562、HL-60、Jurkat、Daudi、IM-9 等成淋巴細(xì)胞、T 細(xì)胞淋巴瘤細(xì)胞以及 HCT-15 上皮細(xì)胞等均可參考使用。

        7、M-199 Medium：1950 年，Morgan 成功研制出具有確定化學(xué)成分的細(xì)胞培養(yǎng)液，即 M-199，主要用于雞胚成纖維細(xì)胞培養(yǎng)。此培養(yǎng)液必須輔以血清才能支持長(zhǎng)期培養(yǎng)。M-199 可用于培養(yǎng)多種種屬來(lái)源的細(xì)胞，并能培養(yǎng)轉(zhuǎn)染的細(xì)胞。

        以前大部分實(shí)驗(yàn)室都是用干粉培養(yǎng)基，但配制過(guò)程就較為繁瑣，要溶解、調(diào)pH值，過(guò)濾，過(guò)程中可能會(huì)產(chǎn)生一些濃度誤差，而且有些實(shí)驗(yàn)室的水質(zhì)并不理想，所以培養(yǎng)的效果會(huì)有差異。如果使用液體培養(yǎng)基，這種人為的誤差會(huì)減少，因?yàn)楫吘故谴笈抗I(yè)化生產(chǎn)的，批間差會(huì)很小。大家是不是感覺(jué)液體培養(yǎng)基會(huì)貴很多，以前是這樣，但現(xiàn)在非也。

        二、培養(yǎng)基在使用過(guò)程中應(yīng)注意的問(wèn)題？

        1、 培養(yǎng)基在使用前需電熱恒溫培養(yǎng)箱內(nèi)37 ℃預(yù)熱或在室溫平衡后再使用。

        2、 細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中，吸取過(guò)培養(yǎng)液的吸管不能再用火焰燒灼，防止殘留在吸管內(nèi)的培養(yǎng)基焦化，將有害物質(zhì)帶入培養(yǎng)液中。

        3、 盡量縮短各種液體、細(xì)胞的暴露時(shí)間。

        4、 避免液體間、細(xì)胞間的交叉污染。

        5、配制*培養(yǎng)基時(shí)，配制的量建議在2周內(nèi)用完為好。因?yàn)橐恍┛股睾脱逯械幕境煞衷诮鈨龊缶烷_(kāi)始降解。

        6、當(dāng)在無(wú)血清培養(yǎng)基中添加抗生素時(shí)，降低至少在有血清培養(yǎng)基中所使用濃度的50%。血清蛋白會(huì)結(jié)合和滅活一些抗生素。在無(wú)血清培養(yǎng)條件下，抗生素不被滅活，可能對(duì)于細(xì)胞達(dá)到毒性水平。

        7、如果細(xì)胞培養(yǎng)基偶然被凍，您應(yīng)該熔化培養(yǎng)基并觀察是否有沉淀產(chǎn)生。如果沒(méi)有沉淀產(chǎn)生，培養(yǎng)基可以正常使用，如果出現(xiàn)沉淀，只能丟棄這些培養(yǎng)基。